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                      當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  大腸桿菌O157選擇性顯色培養(yǎng)基(國(guó)標(biāo))

                      大腸桿菌O157選擇性顯色培養(yǎng)基(國(guó)標(biāo))

                      更新時(shí)間:2020-02-18  |  點(diǎn)擊率:1317

                       

                      貨號(hào)

                      名稱

                      規(guī)格

                      存儲(chǔ)

                      MV1575A

                      HiCrome™ EC O157:H7 Selective Agar Base,Modified(需添加劑FD187)

                      100G,500G

                      2-8℃密閉

                      FD187

                      HiCrome EC O157:H7 Selective Supplement

                      5VL

                      2-8℃

                       

                      原理

                      腸出血性大腸桿菌又名為產(chǎn)Vero細(xì)胞毒素的大腸桿菌(VTEC/EHEC)。盡管有許多血清型大腸桿菌產(chǎn)Vero細(xì)胞毒素(3),但大腸桿菌O157:H7是導(dǎo)致人類感染的常見的一種。它有幾種不常見的生化特性可用于鑒定。它屬于僅少數(shù)的beta葡萄糖醛酸酶(-),24小時(shí)內(nèi)不發(fā)酵山梨醇或鼠李糖。它們可從接種到含山梨醇而非乳糖的培養(yǎng)基的糞便標(biāo)本中分離出來。

                       

                      該款顯色培養(yǎng)基采用植物源蛋白胨,以取代動(dòng)物源,避免了BSE/TSE風(fēng)險(xiǎn)。它基于 Rappaport 和Henigh(1)描述的配方而成。培養(yǎng)基含山梨醇和顯色混合劑,不含乳糖和指示劑染料。顯色劑被大腸桿菌O157:H7 特異性裂解,產(chǎn)生深紫至洋紅色。普通大腸桿菌形成藍(lán)綠色菌落。

                       

                      培養(yǎng)基中的HiVeg的水解物和酵母粉提供碳源、氮源營(yíng)養(yǎng)和長(zhǎng)鏈氨基酸、維生素和其他生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)。氯化鈉維持滲透壓平衡。添加劑使培養(yǎng)基更具有選擇性(2)。添加劑中的亞碲酸鉀選擇性抑制氣單胞菌和普羅威登菌。添加劑中的新生霉素抑制革蘭陽性菌。月桂基硫酸鈉抑制伴隨的革蘭陽性菌群。

                       

                      培養(yǎng)基成分

                      組成                                G/L

                      HiVeg的水解物                   5.000

                      酵母粉                           3.000

                      山梨醇                           7.000  

                      合成離子活性劑1號(hào)         1.500

                      月桂基硫酸鈉                  0.100

                      顯色混合劑                     0.250

                      瓊脂                              15.000

                      pH(25°C) 6.8±0.2

                       

                      配制

                      31.85g溶于990ml蒸餾水,加熱至沸使*溶解。高壓滅菌后,冷卻至45-50℃,無菌加入復(fù)溶的添加劑(貨號(hào)FD187,先用10ml蒸餾水復(fù)溶)。混勻并傾注平板。

                       

                      質(zhì)量控制

                      外觀:奶油色至黃色均一自由粉末

                      成膠性: 牢固,與1.5%瓊脂相當(dāng)

                      制備好的培養(yǎng)基顏色和透明度:在平皿中為淺琥珀色,透明至輕微不透明凝膠

                      配比反應(yīng)25°C下3.18% w/v水溶液,pH值為6.8±0.2

                      pH值要求6.60-7.00

                      培養(yǎng)反應(yīng)

                      加入添加劑(貨號(hào)FD187)后,在35-37°C培養(yǎng)18-24小時(shí),觀察如下:

                       

                      菌種

                      接種量(CFU)

                      生長(zhǎng)狀況

                      回收率

                      菌落顏色

                      大腸桿菌ATCC 25922

                      50-100

                      生長(zhǎng)很少

                      ≤10%

                      藍(lán)綠色

                      大腸桿菌O157:H7 NCTC 12900

                      50-100

                      旺盛

                      ≥50%

                      深紫-洋紅色

                      肺炎克雷伯菌

                      ATCC 13883

                      50-100

                      一般-好

                      30-40%

                      無色-淡紫色(黏液狀)

                      銅綠假單胞菌

                      ATCC 27853

                      50-100

                      一般-好

                      30-40%

                      無色

                      金黃色葡萄球菌

                      ATCC 25923

                      ≥103

                      抑制

                      0%

                       

                      枯草芽孢桿菌

                      ATCC 6633

                      ≥103

                      抑制

                      0%

                       

                       

                      參考文獻(xiàn)

                      1.Rappaport F.and Henigh E.,1952,J.Clin.Pathol.,5:361.

                      2.Zadik P.M.,Cahpman P.A.and Siddons C. A.,1993,J.Med.Microbiol.,39,155-158.

                      3.Smith and Scottland,1988,J.Med.Microbiol.,26:77-85

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