在生物或細(xì)胞藥物生產(chǎn)過程中，進(jìn)行支原體檢測(cè)是非常重要的，這是因?yàn)橹гw的存在可能對(duì)藥物產(chǎn)品的質(zhì)量、安全性和有效性產(chǎn)生嚴(yán)重的影響。因此，各國(guó)相關(guān)法規(guī)，都對(duì)藥物的支原體檢測(cè)有相關(guān)要求。

核酸法檢測(cè)支原體，更加快捷高效，且靈敏度和準(zhǔn)確度都很高，正在被越來越多的企業(yè)所使用。而核酸法中的qPCR檢測(cè)法，是目前較為常見的方法，本期內(nèi)容，將詳細(xì)介紹德國(guó)Minerva Biolabs公司生產(chǎn)的Venor GeM qOneStep試劑盒的特點(diǎn)。

德國(guó)Minerva Biolabs公司生產(chǎn)的Venor GeM qOneStep，是一種基于實(shí)時(shí)熒光定量 PCR （qPCR） 檢測(cè)的試劑盒，用于快速、穩(wěn)定和靈敏地檢測(cè)支原體污染。該檢測(cè)系統(tǒng)專門針對(duì)目前被描述為細(xì)胞培養(yǎng)物和培養(yǎng)基成分的已知污染物的所有的支原體物種（Mollicute）。

該試劑盒提供的檢測(cè)方案，可用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液的快速而可靠的篩查。檢測(cè)過程可在3小時(shí)內(nèi)完成。引物、核苷酸、探針、聚合酶和內(nèi)部擴(kuò)增控制已作為預(yù)制、凍干的反應(yīng)混合物提供。復(fù)溶緩沖液和凍干的陽性對(duì)照DNA也已包含在內(nèi)。

該檢測(cè)可以在絕大多數(shù)能夠檢測(cè)熒光染料 FAM™ 和 HEX™ 的qPCR一起中進(jìn)行。特異性擴(kuò)增對(duì)支原體的檢測(cè)發(fā)生在 520 nm處（FAM™ 通道）。由于內(nèi)部控制DNA已包含在 qOneStep Mix 中，由 PCR 抑制和/或DNA提取問題引起的假陰性結(jié)果可被可靠地識(shí)別出來。內(nèi)部擴(kuò)增控制的擴(kuò)增在 560 nm處被檢測(cè)到（HEX™ 通道）。

推薦用途：

適用于細(xì)胞培養(yǎng)和生物制品的直接檢測(cè)，可在科研和工業(yè)領(lǐng)域應(yīng)用。僅用于科研用途，不建議用于臨床診斷或人體樣本測(cè)試。注意！不適用于與AccuSEQ軟件一起在ABI 7500/7500 Fast上使用！

試劑盒成分：

凍干混合物：引物組 / 核苷酸 / 探針 / 內(nèi)部擴(kuò)增控制DNA和聚合酶，優(yōu)化濃度，每個(gè)含有25次反應(yīng)的小分子 

復(fù)溶緩沖液 

凍干的陽性對(duì)照DNA 

PCR級(jí)水

未打開的試劑盒組分請(qǐng)存放在+2 °C至+8 °C的溫度下，并注意包裝上的限用日期。一旦復(fù)溶，試劑的存儲(chǔ)溫度必須≤ -18 °C，且不建議反復(fù)凍融。