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                      讓人頭疼的支原體污染如何去除(普通細胞)?

                      更新時間:2022-10-19  |  點擊率:588

                      細胞污染支原體,是令細胞培養(yǎng)相關(guān)從業(yè)者十分頭疼的問題。細胞感染了支原體又不愿丟棄怎么辦?本系列內(nèi)容分情況為大家解答。

                      01

                      普通細胞支原體祛除

                      適用范圍

                      對于費力擴增的細胞(如已轉(zhuǎn)染,或經(jīng)過體外刺激),如果細胞中發(fā)現(xiàn)有支原體污染,但此細胞又不愿丟棄,希望繼續(xù)培養(yǎng),推薦使用MB公司生產(chǎn)的復(fù)合抗生素Zell Shield®。

                      02

                      Zell Shield®特點

                      ·特點

                      • 高效廣譜:Zell Shield®通過阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。

                      • 安全:無細胞毒性,采用復(fù)合支原體敏感抗生素,對大多數(shù)細胞株無毒。

                      • 活性穩(wěn)定:在細胞培養(yǎng)期間,Zell Shield®始終保持穩(wěn)定的活性。

                      • 使用方便:Zell Shield®為無菌溶液,可直接加入培養(yǎng)基使用。

                      03

                      Zell Shield®使用方法

                      使用方法

                      (1)在每次使用Zell Shield®之前,細胞傳代時,先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細胞,再使用加了Zell Shield®的培養(yǎng)基養(yǎng)細胞,能達到*佳的祛除支原體的效果。

                      (2)Zell Shield®常規(guī)為-18℃保存,建議使用前,先融化分裝,仍舊-18℃避光保存,使用時按需融化配置。避免反復(fù)凍融。

                      (3)Zell Shield®按1:100濃度可直接加入培養(yǎng)基。例如:500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield®,50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培養(yǎng)基使用。

                      什么是懸浮沖洗法

                      據(jù)研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。細胞傳代時,用干凈的PBS反復(fù)懸浮沖洗,就能把70%以上的支原體沖下來。

                      支原體直徑在180~350nm之間,遠遠小于細胞直徑。通過低速離心,很容易將細胞和支原體分離,棄上清即可祛除大部分支原體。

                      簡要步驟

                      消化細胞

                      ?

                      離心

                      ?

                      棄上清

                      ?

                      PBS清洗細胞

                      ?

                      低速離心棄上清

                      重復(fù)清洗3次

                      ?

                      加入含有Zell Shield®的

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